Technologia nowej generacji przyspieszająca tworzenie modeli myszy
Technologia TurboMice™
Opracowany przez MingCeler poprzez serię optymalizacji uzupełniania tetraploidalnego.
Poprzez połączeniePrecyzyjna technologia edycji genówi zoptymalizowana myszTechnologia przygotowania embrionalnych komórek macierzystych, możemy teraz edytować prawie każdy docelowy locus genu.
Technologia TurboMice™
Nasza wysoce wydajna technologia uzupełniania tetraploidalnego pozwoliła nam znacznie zwiększyć współczynnik urodzeń myszy z 1%-5% do 30%-60% w przypadku komórek macierzystych poddanych edycji genów, prawie dorównując wydajności normalnego transferu zarodków.
MingCeler jest pierwszą firmą na świecie, która pomyślnie przeprowadziła transformację technologii uzupełniania tetraploidalnego z zastosowań laboratoryjnych do zastosowań przemysłowych.
Tradycyjna technologia
Tradycyjna technologia modelowania zwierząt, taka jak mikroiniekcja przedjądrowa i celowanie w ES, obejmuje hodowlę co najmniej 2–3 pokoleń w celu uzyskania myszy o genotypie homozygotycznym, co zwykle zajmuje 6–8 miesięcy.
Ten długotrwały proces znacząco utrudnia postęp i skuteczność opracowywania nowych leków i badań nad chorobami.
Szybka partia
1. do 20 homozygotycznych myszy z edytowanym genem2-4 miesiące.
2. ≈ 50 homozygotycznych myszy w następującym zakresie2 miesiące.
3. Ponad 400 homozygotycznych myszy w środku8-12 miesięcy.
Opis przypadku w 2020 roku
Do szybkiej produkcji wykorzystano technologię TurboMice™500 homozygothumanizowane myszy ACE2 w ciągu zaledwie8 miesięcydo badań leków i szczepionek na Covid-19.
Elastyczny wybór szczepu
Tradycyjne techniki wiążą się ze znacznymi ograniczeniami w wyborze szczepu myszy, podczas gdy technologia TurboMice™ zapewnia większą elastyczność przy wyborze różnych szczepów wsobnych i niekrewnionych (w tym Balb /c, ICR, C57BL/6 itp.).
● Myszy generacji F0 skonstruowane przy użyciu technologii TurboMice™ są myszami docelowymi o pochodzeniu jednokomórkowym.
● Zatem materiał genetyczny myszy F0 jest identyczny, co ogranicza błędy eksperymentalne spowodowane zmiennością materiału genetycznego.
● Zatem dane eksperymentalne dotyczące oceny skuteczności leku i innych eksperymentów są bardziej spójne i wiarygodne.
Utrzymuje dobrą integralność genetyczną
Precyzyjna edycja genów in situ
● Precyzyjna edycja genów in situ z precyzyjnymi poziomami ekspresji genów i dokładną specyficznością tkankową.
● Humanizowane myszy ACE2 opracowane tradycyjnymi technikami są generowane przez egzogenne wprowadzenie promotora K18-ACE2, którego nie można osiągnąć precyzyjnej edycji z powodu losowego wstawienia, co skutkuje brakiem specyficzności tkankowej ekspresji ACE2 w skonstruowanym humanizowanym modelu myszy ACE2 .
● Humanizowane myszy ACE2 firmy MingCeler wykazują specyficzną ekspresję w różnych narządach (grafiki C i D powyżej) i skutecznie symulują cechy kliniczne po zakażeniu SARS-CoV-2.
Unikalna platforma EnhancerPlus
●Zastrzeżona platforma EnhancerPlus firmy MingCeler może pomóc naszym klientom poprawić poziom ekspresji humanizowanych genów.
● W wyniku lat gromadzenia danych w badaniach epigenetycznych i określania losu komórek platforma EnhancerPlus firmy MingCeler może dokładnie przewidywać pozycje genomowe wzmacniaczy, dzięki czemu projektowanie strategii edycji genów opiera się na dowodach.
● W rezultacie geny docelowe mogą lepiej przypominać wzorce ekspresji i poziomy genów endogennych.
Opis przypadku: Humanizacja genu X.
● Wykorzystując platformę EnhancerPlus, strategia została zoptymalizowana, a poziom ekspresji wzrósł o trzy rzędy wielkości (patrz grafika powyżej), osiągając wymagania dotyczące opracowywania leku określone przez klienta na poziomie białka.
● Po ukończeniu pierwszej na świecie masowej produkcji humanizowanych myszy ACE2 w 2020 r. firma MingCeler unowocześniła model humanizowanych myszy ACE2 w czterech iteracjach poprzez optymalizację EnhancerPlus, przy czym poziom ekspresji humanizowanego ACE2 ostatecznie osiągnął poziom zbliżony do endogennej ekspresji mysiego ACE2.
Poziomy ekspresji humanizowanego ACE2 w różnych narządach modeli humanizowanych myszy
Edycja genów w wielu lokalizacjach
● Technologia TurboMice™ to najlepszy wybór na rynku do generowania wielolocusowych, kombinatorycznych modeli myszy z edycją genów, zapewniających korzyści w postaci wysokiej dokładności wstawiania lokalizacji, wstawiania długich fragmentów i wielu genetycznie zmodyfikowanych loci, bez problemów z segregacją alleli.
● Technologia TurboMice™ umożliwia jednoczesną edycję maksymalnie 3 genów w celu wytworzenia homozygotycznych, wielolocusowych modeli myszy z edytowaną genem bezpośrednio z embrionalnych komórek macierzystych poddanych edycji genów, bez konieczności przeprowadzania czasochłonnych procesów hodowli/przesiewu, zapewniając różnorodność złożonych modeli o wysokiej wartości niezbędnych do badań nad innowacyjnymi lekami.
● W krótkim czasie firma MingCeler z powodzeniem opracowała różne modele myszy z edytowaniem genów w wielu loci, w oparciu o humanizowane myszy ACE2.
Edycja genów długich fragmentów
Technologia TurboMice™ umożliwia precyzyjną edycję genów długich fragmentów o wielkości ponad 20 kb, ułatwiając szybkie tworzenie złożonych modeli, takich jak humanizacja, warunkowe wycinanie (CKO) i wprowadzanie dużych fragmentów (KI).
Publikacje
[1] Wang G, Yang ML, Duan ZL, Liu FL, Jin L, Long CB, Zhang M, Tang XP, Xu L, Li YC, Kamau PM, Yang L, Liu HQ, Xu JW, Chen JK, Zheng YT , Peng XZ, Lai R. Dalbawancyna wiąże ACE2, blokując jego interakcję z białkiem szczytowym SARS-CoV-2 i skutecznie hamuje infekcję SARS-CoV-2 w modelach zwierzęcych.Rozdzielczość komórki2021 styczeń;31(1):17-24.doi: 10.1038/s41422-020-00450-0.( JEŻELI: 20,507 )
[2] Liu FL, Wu K, Sun J, Duan Z, Quan X, Kuang J, Chu S, Pang W, Gao H, Xu L, Li YC, Zhang HL, Wang XH, Luo RH, Feng XL, Schöler HR , Chen X, Pei D, Wu G, Zheng YT, Chen J. Szybka generacja humanizowanego modelu myszy wsobnej ACE2 dla COVID-19 z uzupełnieniem tetraploidalnym.Natl Sci Rev. 2020, 24 listopada;8(2):nwaa285.doi: 10.1093/nsr/nwaa285.( JEŻELI: 16,693 )
Przepływ usług
Wszystko, co musisz zrobić, to podać nam wymagania dotyczące modyfikacji genów dla modelu myszy.Na podstawie Twoich specyfikacji przygotujemy indywidualny plan wstępny, a po dalszych dyskusjach i obopólnym ustaleniu podpiszemy umowę o świadczenie usług technicznych.Po rozpoczęciu projektu będziemy na bieżąco informować o postępach.